中国GMP第一章 总则 第三条

本规范作为质量管理体系的一部分，是药品生产管理和质量控制的基本要求，旨在最大限度地降低药品生产过程中污染、交叉污染以及混淆、差错等风险，确保持续稳定地生产出符合预定用途和注册要求的药品。

中国药典2015年版四部通则 <1106>

控制菌检查法系用于在规定的试验条件下，检查供试品中是否存在特定的微生物。……供试品检出控制菌或其他致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。

中国药典2015年版四部通则 <1107>

本限度标准所列的控制菌对于控制某些药品的微生物质量可能并不全面，因此，对于原料、辅料及某些特定的制剂，根据原辅料及其制剂的特性和用途、制剂的生产工艺等因素，可能还需要检查其他具有潜在危害的微生物。

其他具有潜在危害的微生物是什么？ 在超过药典标准中控制菌范围之外的微生物会有一个新的名称:不可接受微生物（Objectionable Microorganisms）。

判断某种微生物是否是不可接受微生物时需要结合不同的角度和标准进行评估，包括分离微生物的描述（准确鉴定、分析致病性、分析特性及常见来源等）、分离微生物的载荷、产品给药途径、产品特性、用药人群等综合分析。

图1 不可接受微生物风险评估决策树（来源：PDA）

图2 与产品召回、非无菌制剂引起的感染及临床感染相关的常见微生物种类（来源：PDA）
 

在FDA召回的非无菌产品中，洋葱伯克霍尔德菌（B.cepacia）污染是涉及召回次数最多的微生物污染召回事件，在2004-2011年FDA召回事件中的不可接受微生物，占三分之一的污染微生物为洋葱伯克霍尔德菌（Burkholderia cepacia）。

图3 2004-2011年FDA召回事件中的不可接受微生物

   最开始，洋葱伯克霍尔德菌并未被列入USP的控制菌检查范围内，它对药品的潜在威胁性是在2018年9月底举行的PDA/FDA会议中被提出。目前，USP<60> MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS—TESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX已于2019年12月1日生效，正式将洋葱伯克霍尔德复合体纳入了USP控制菌检查项目。
 

 

洋葱伯克霍尔德菌

   洋葱伯克霍尔德菌群（Burkholderia cepacia complex , BCC ），是一类隶属于β-变形菌纲，伯克霍尔德菌目，伯克霍尔德菌科，伯克霍尔德菌属的，表型近似，基因存在差异，环境中普遍的革兰氏阴性菌的总称 。

洋葱伯克霍尔德菌是自然界中分离获得该菌群最常见代表菌株之一。

特点：革兰氏阴性杆菌；代谢谱广，对严苛环境的适应能力强；自然环境及人类活动范围中广泛分布；可使动植物（包括人类）致病。

 

USP<60> 规定了使用TSB对样品进行预培养，在BCSA培养基上划线选择性培养。洋葱伯克霍尔德菌可能存在的指示特征为周围黄色的绿棕色菌落，或者周围粉红色的白色菌落。挑选可疑菌进行鉴定。

关于BCSA琼脂培养基

培养基原理：酪胨和酵母提取物提供丰富的氮源，乳糖和蔗糖提供两种碳源，酚红指示剂，结晶紫、万古霉素抑制革兰氏阳性菌的生长，庆大霉素抑制部分革兰氏阴性菌的生长，多粘菌素B可抑制铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌、鲍曼不动杆菌等菌的生长。

目前，北京三药针对洋葱伯克霍尔德菌的检验开发了两种培养基，洋葱伯克霍尔德菌选择性琼脂基础（符合USP）和BCC培养基基础以及对应的配套试剂，欢迎各位老师咨询交流。